马前军, 韩莲花, 李红霞, 朱君, 储珍玉, 杨向军
苏州大学附属第一医院
目的 苯肾上腺素刺激体外培养的乳鼠心室肌细胞,观察经典瞬时电位通道(Canonical Transient Receptor Potential, TRPC)的表达改变。
方法 建立苯肾上腺素诱导心室肌细胞肥大模型,运用实时定量RT-PCR 检测经典瞬时电位通道1~7转录改变和Western blot法检测经典瞬时电位通道3蛋白表达变化;采用Fura-2/AM作为细胞内钙离子的荧光探针负载培养的心室肌细胞,结合阳离子测定系统检测胞内游离钙浓度的变化。
结果 苯肾上腺素刺激体外培养的心室肌细胞,细胞体积增大。实时定量RT-PCR 检测到心室肌细胞TRPC1~7mRNA 表达,但仅肥大心室肌细胞TRPC3mRNA 表达高于对照组(P<0.01)。同时肥大心室肌细胞TRPC3 蛋白表达高于对照组(P < 0.05)。并且肥大心室肌细胞的静息胞质游离钙浓度高于对照组(P < 0.05),而受体介导钙内流阻滞剂SKF-96365 减低心室肌细胞的胞质游离钙浓度(P < 0.05)。
结论 作为非选择性钙离子通道的TRPC3 通道,在苯肾上腺素诱导的肥大心室肌细胞中,其表达增高。