尽管观察性研究认为服用维生素和叶酸可能降低心血管事件。然而WAFACS试验结果却证实维生素、叶酸对心血管疾病的预防无效。
WAFACS试验是由波士顿女子医院进行的随机研究，共入选5442例已有心血管疾病或至少有3个心血管疾病危险因素的女性患者。随机分为药物组和安慰剂组，药物组服用叶酸2.5 mg/d、维生素B6 50 mg/d、维生素B12 1 mg/d。平均随访7.29年。试验结果显示，服用叶酸2.5 mg/d、维生素B6 50 mg/d、维生素B12 1 mg/d尽管能降低半胱氨酸水平，但是不能降低心肌梗死、卒中、再次血运重建或心脑血管死亡的联合终点事件，对于心血管高危患者的一级预防也不能获益。
WAFACS试验结果与过去的几个试验（VISP、NORVIT、HOPE-2）结果一致，都明确地证实了服用维生素和叶酸不能降低心血管事件。